蒸馏水 1000ml
6.2 制法 除葡萄糖外,上述各成分混合,加热使溶。加入葡萄糖混匀。分装锥形瓶,115℃灭菌15分钟。
6.3 用途 蜜浆剂酵母菌数测定用。
7.胆盐乳糖(BL)增菌液
7.1 成分
蛋白胨 20g
氯化钠 5g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 4g
(或K2HPO4·3H2O 5.2g)
磷酸二氢钾 1.3g
牛胆盐 1.3g
(或去氧胆酸钠 0.25g)
乳糖 5g
蒸馏水 1000ml
PH7.4
7.2 制法 除乳糖、胆盐(或去氧胆酸钠)外,将上述其它成分混合,微温使溶,校正PH,加入乳糖、胆盐(或去氧胆酸钠)混匀分装于150ml锥形瓶内,115℃灭菌30分钟。
7.3 用途:用于大肠杆菌和绿脓杆菌的增菌培养。
注:胆盐是抑菌剂,对革兰氏阳性菌有良好的抑菌作用,但用量过大,对大肠杆菌亦有抑菌作用。每1000ml培养基中胆盐用量如下:
牛胆盐、去氧胆酸钠如上述处方量,猪胆盐5g,羊胆盐5g,三号胆盐(Bile salt NO.3),五号胆盐1.5g。
8.伊红美蓝琼脂(EMB)
8.1 成分
普通肉汤琼脂(PH7.4) 1000ml
乳糖 10g
2%伊红Y水溶液 20ml
0.5%美蓝水溶液 13~16ml
8.2 制法 将乳糖加入肉汤琼脂内,加热融化琼脂,冷至60℃左右,加入伊红和美蓝灭菌溶液,摇匀,倾注平板,冷凝后备用。
8.3 用途 大肠杆菌及沙门氏菌分离培养用。
9.麦康凯琼脂
9.1 成分
蛋白胨 20g
猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g
氯化钠 5g
琼脂 15~20g
蒸馏水 1000ml
乳糖 10g
1%或0.5%中性红水溶液 2.5或5ml
PH7.2~7.4
9.2 制法 除琼脂、乳糖、胆盐、中性红水溶液外,将其它成分混合,加温溶解,校正PH,加入琼脂,煮沸至琼脂溶化后过滤。加入胆盐乳糖、中性红水溶液,摇匀分装。115℃灭菌30分钟。制成平板备用。注意避光保存。
9.3 用途 大肠杆菌及沙门氏菌分离培养用
10.蛋白胨水培养基
10.1 成分
胰蛋白胨(或多价蛋白胨) 10g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000ml
PH7.2~7.4
10.2 制法 上述各成分混合,加热溶化,校正PH。分装小试管(13×100mm),121℃灭菌20分钟
10.3 用途 供靛基质试验用
11.磷酸盐葡萄糖胨水培养基
11.1 成分
多价胨 7g
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O) 5g
葡萄糖 5g
蒸馏水 1000ml
PH7.2~7.4
11.2 制法 上述各成分混合,微温使溶,校正PH,分装小试管,121℃灭菌15分钟。
11.3 用途 供甲基红及VP试验用。
12.西蒙氏柠檬酸盐培养基
12.1 成分
氯化钠 5g
硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g
磷酸氢二钾 1g
柠檬酸钠(无水) 2g
琼脂 15~20g
0.4%溴麝香草酚蓝(B·T·B)液 20ml
蒸馏水 1000ml
PH6.8~7.0
12.2 制法 除B·T·B和琼脂外,混合各成分,微温使溶,校正PH,加入琼脂,加热溶化,加入指示剂混匀。分装小试管。121℃灭菌15分钟。放成斜面。
12.3 用途 供柠檬酸盐利用试验用
注:所用琼脂应不舍游离糖,用前可用水浸泡冲洗。
13.糖·醇发酵培培养基
13.1 成分
基础液
蛋白胨 10g
氯化钠 5g
蒸馏水 1000ml
指示剂
0.5%酸性复红指示剂 10ml
(或0.4%溴麝香草酚蓝 6ml)
糖、醇 0.5%
13.2 制法 胨和氯化钠加入蒸馏水中,微温使用,校正PH,加入指示剂混匀。分装每瓶100ml,121℃灭菌15分钟。
配制葡萄糖发酵管时,于100ml基础液中加入0.5g葡萄糖,分装于含小倒管的小试管中;配制其它糖醇发酵管时,将各种糖、醇分别配成10%溶液,与基础液同时高压灭菌(121℃15分钟)。将5ml糖醇溶液加入100ml基础液内,无菌操作分装于灭菌小试管中。
注 糖醇溶液亦可采用滤膜法过滤除菌。
13.3 用途 供鉴别待检菌的糖类发酵反应用。
14.5%乳糖发酵管
14.1 成分
蛋白胨 0.2g
氯化钠 0.3g
磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O) 0.2g
0.4%溴麝香草酚蓝液 0.6ml
乳糖 5g
蒸馏水 100ml
PH7.4
14.2 制法 除乳糖和指示剂外,混合各成分,微温使溶,校正PH,加入乳糖及指示剂混匀,分装于含有小倒管的灭菌小试管中,115℃灭菌15分钟。
14.3 用途 供迟缓发酵乳糖细菌鉴别用。
15.四硫磺酸盐增菌液
15.1 成分
基础液
蛋白胨 5g
胆盐 1g
碳酸钙 10g
硫代硫酸钠 30g
蒸馏水 1000ml
碘溶液
碘 6g
磺化钾 5g
蒸馏水 20ml
15.2 制法 基础液各成分混合,加热溶解,分装每瓶100ml。分装时应随时振摇,使其中碳酸钙混匀。121℃灭菌20分钟。
临用前每100ml基础液中加入碘溶液2ml,0.1%煌绿溶液1ml,混匀,分装每管10ml。
15.3 用途 沙门氏菌增菌培养用。
16.三糖铁琼脂(TSI)
16.1 成分
蛋白胨 15g
蛋白□ 5g或蛋白胨5g
牛肉膏 5g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
硫酸亚铁 0.2g
硫代硫酸钠 0.2g
琼脂 12~15g
0.2%酚红溶液 12.5ml
蒸馏水 1000ml
PH7.4
16.2 制法 除糖、指示剂、硫酸亚铁和硫代硫酸钠外,以上各成分加入蒸馏水中,加温溶解。加入糖、硫酸亚铁及硫代硫酸钠(后二者先用少量水溶解),校正PH。加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀。分装小试管,装量宜较多。115℃灭菌30分钟。放置高层斜面,凝后置冷暗处保存备用。
16.3 用途 供肠道菌初步鉴别用
17.DHL 琼脂 (Deaxycholate Hydrogen
Sulfide LactoseAgar)
17.1 成分
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
去氧胆酸钠 1g
硫代硫酸钠 2.3g
柠檬酸钠 1g
柠檬酸铁铵 1g
中性红 0.03g
琼脂 18~20g
蒸馏水 1000ml
PH7.3
17.2 制法 除中性红、琼脂外,各成分溶解于400ml蒸馏水中,校正PH,再将琼脂于600ml蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,加入0.5%中性红液6ml,待冷至50~55℃,倾注平板。
17.3 用途 沙门氏菌分离培养用
18.SS琼脂培养基
18.1 成分
蛋白胨 5g
牛肉膏 5g
琼脂 20g
乳糖 10g
胆盐 8.5g
柠檬酸钠(Na3C(6H5O72H2O) 8.5g
硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O) 8.5g
柠檬酸铁铵 1g
1%中性红水溶液 2.5ml
0.1%煌绿溶液(新配) 0.33ml
蒸馏水 1000ml
PH7.4
18.2 制法 先将蛋白胨、琼脂、蒸馏水制成PH7.4的普通肉汤琼脂,121℃灭菌20分钟。趁热加入乳糖、摇匀。再依次加入其它成分,充分摇匀,使溶解,倒成平板备用。
18.3 用途 沙门氏菌分离培养用
注:配好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内,3天用完。
19.尿素琼脂
19.1 成分
蛋白胨 1g
氯化钠 5g
葡萄糖 1g
磷酸二氢钾 2g
0.2%酚红溶液 6ml
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
20%尿素溶液 100ml
PH7.2±0.1
19.2 制法 将除尿素和琼脂以外的成分配好,校正PH,加入琼脂,加热溶化并分装锥形瓶。121℃高压灭菌20分钟。冷至50~55℃,加入经过滤除菌的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%,分装于灭菌试管内,放成斜面备用。
19.3 用途 沙门氏菌鉴别用。
20.氰化钾培养基
20.1 成分
多价蛋白胨 3g
氯化钠 5g
磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.225g
磷酸氢二钠(Ka2HPO4) 5.64g
蒸馏水 1000ml
0.5%氰化钾溶液
PH7.6
20.2 制法 除氰化钾外,以上成分配好后,校正PH,121℃灭菌20分钟。冷却后,每100ml培养基加入0.5%氰化钾溶液1.5ml,分装于12×100mm灭菌试管,每管4ml,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,置4℃冰箱内,可保存两个月。同时,以不加氰化钾的培养基作对照培养基,分装试管备用。
20.3 用途 沙门氏菌鉴别用
注:1.氰化钾为剧毒药,操作时应特别小心。培养基用后,每管加入几粒硫酸亚铁和0.5ml 20%氢氧化钾去毒,再灭菌洗刷。
2.封口不严。氰化钾分解逸出,致使药物浓度降低,是造成假阳性的主要原因,故应特别注意。
21.氨基酸脱羧酶试验培养基
21.1 成分
蛋白胨 5g
酵母浸膏 3g
葡萄糖 1g
蒸馏水 1000ml
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml
L—氨基酸或DL—氨基酸 0.5或1g/100ml
PH6.8
21.2 制法:除氨基酸外,以上成分加热溶解后,校正PH,分装每瓶100ml。分别加入各种氨基酸:赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。L—氨基酸按0.5%加入,DL—氨基酸按1%加入。再行校正PH至6.8。同时以不加氨基酸的培养基作为对照培养基。分装于灭菌的小试管内,每管1ml,并滴加一层液体石蜡,121℃灭菌10分钟。
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