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药品卫生检验方法

  蒸馏水                   1000ml
  6.2 制法 除葡萄糖外,上述各成分混合,加热使溶。加入葡萄糖混匀。分装锥形瓶,115℃灭菌15分钟。
  6.3 用途 蜜浆剂酵母菌数测定用。
  7.胆盐乳糖(BL)增菌液
  7.1 成分
  蛋白胨                     20g
  氯化钠                      5g
  磷酸氢二钾(K2HPO4)             4g
  (或K2HPO4·3H2O           5.2g)
  磷酸二氢钾                  1.3g
  牛胆盐                    1.3g
  (或去氧胆酸钠               0.25g)
  乳糖                       5g
  蒸馏水                  1000ml
          PH7.4
  7.2 制法 除乳糖、胆盐(或去氧胆酸钠)外,将上述其它成分混合,微温使溶,校正PH,加入乳糖、胆盐(或去氧胆酸钠)混匀分装于150ml锥形瓶内,115℃灭菌30分钟。
  7.3 用途:用于大肠杆菌和绿脓杆菌的增菌培养。
  注:胆盐是抑菌剂,对革兰氏阳性菌有良好的抑菌作用,但用量过大,对大肠杆菌亦有抑菌作用。每1000ml培养基中胆盐用量如下:
  牛胆盐、去氧胆酸钠如上述处方量,猪胆盐5g,羊胆盐5g,三号胆盐(Bile salt NO.3),五号胆盐1.5g。
  8.伊红美蓝琼脂(EMB)
  8.1 成分
  普通肉汤琼脂(PH7.4)         1000ml
  乳糖                       10g
  2%伊红Y水溶液                20ml
  0.5%美蓝水溶液            13~16ml
  8.2 制法 将乳糖加入肉汤琼脂内,加热融化琼脂,冷至60℃左右,加入伊红和美蓝灭菌溶液,摇匀,倾注平板,冷凝后备用。
  8.3 用途 大肠杆菌及沙门氏菌分离培养用。
  9.麦康凯琼脂
  9.1 成分
  蛋白胨                       20g
  猪胆盐(或牛、羊胆盐)                5g
  氯化钠                        5g
  琼脂                     15~20g
  蒸馏水                    1000ml
  乳糖                        10g
  1%或0.5%中性红水溶液         2.5或5ml
                 PH7.2~7.4
  9.2 制法 除琼脂、乳糖、胆盐、中性红水溶液外,将其它成分混合,加温溶解,校正PH,加入琼脂,煮沸至琼脂溶化后过滤。加入胆盐乳糖、中性红水溶液,摇匀分装。115℃灭菌30分钟。制成平板备用。注意避光保存。
  9.3 用途 大肠杆菌及沙门氏菌分离培养用
  10.蛋白胨水培养基
  10.1 成分
  胰蛋白胨(或多价蛋白胨)               10g
  氯化钠                         5g
  蒸馏水                     1000ml
                PH7.2~7.4
  10.2 制法 上述各成分混合,加热溶化,校正PH。分装小试管(13×100mm),121℃灭菌20分钟
  10.3 用途 供靛基质试验用
  11.磷酸盐葡萄糖胨水培养基
  11.1 成分
  多价胨                       7g
  磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)          5g
  葡萄糖                       5g
  蒸馏水                    1000ml
              PH7.2~7.4
  11.2 制法 上述各成分混合,微温使溶,校正PH,分装小试管,121℃灭菌15分钟。
  11.3 用途 供甲基红及VP试验用。
  12.西蒙氏柠檬酸盐培养基
  12.1 成分
  氯化钠                        5g
  硫酸镁(MgSO4·7H2O)           0.2g
  磷酸氢二钾                      1g
  柠檬酸钠(无水)                   2g
  琼脂                     15~20g
  0.4%溴麝香草酚蓝(B·T·B)液       20ml
  蒸馏水                    1000ml
            PH6.8~7.0
  12.2 制法 除B·T·B和琼脂外,混合各成分,微温使溶,校正PH,加入琼脂,加热溶化,加入指示剂混匀。分装小试管。121℃灭菌15分钟。放成斜面。
  12.3 用途 供柠檬酸盐利用试验用
  注:所用琼脂应不舍游离糖,用前可用水浸泡冲洗。
  13.糖·醇发酵培培养基
  13.1 成分
  基础液
  蛋白胨                     10g
  氯化钠                      5g
  蒸馏水                  1000ml
  指示剂
  0.5%酸性复红指示剂            10ml
  (或0.4%溴麝香草酚蓝            6ml)
  糖、醇                    0.5%
  13.2 制法 胨和氯化钠加入蒸馏水中,微温使用,校正PH,加入指示剂混匀。分装每瓶100ml,121℃灭菌15分钟。
  配制葡萄糖发酵管时,于100ml基础液中加入0.5g葡萄糖,分装于含小倒管的小试管中;配制其它糖醇发酵管时,将各种糖、醇分别配成10%溶液,与基础液同时高压灭菌(121℃15分钟)。将5ml糖醇溶液加入100ml基础液内,无菌操作分装于灭菌小试管中。
  注 糖醇溶液亦可采用滤膜法过滤除菌。
  13.3 用途 供鉴别待检菌的糖类发酵反应用。
  14.5%乳糖发酵管
  14.1 成分
  蛋白胨                    0.2g
  氯化钠                    0.3g
  磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O)      0.2g
  0.4%溴麝香草酚蓝液           0.6ml
  乳糖                       5g
  蒸馏水                   100ml
              PH7.4
  14.2 制法 除乳糖和指示剂外,混合各成分,微温使溶,校正PH,加入乳糖及指示剂混匀,分装于含有小倒管的灭菌小试管中,115℃灭菌15分钟。
  14.3 用途 供迟缓发酵乳糖细菌鉴别用。
  15.四硫磺酸盐增菌液
  15.1 成分
  基础液
  蛋白胨                        5g
  胆盐                         1g
  碳酸钙                       10g
  硫代硫酸钠                     30g
  蒸馏水                    1000ml
  碘溶液
  碘                          6g
  磺化钾                        5g
  蒸馏水                      20ml
  15.2 制法 基础液各成分混合,加热溶解,分装每瓶100ml。分装时应随时振摇,使其中碳酸钙混匀。121℃灭菌20分钟。
  临用前每100ml基础液中加入碘溶液2ml,0.1%煌绿溶液1ml,混匀,分装每管10ml。
  15.3 用途 沙门氏菌增菌培养用。
  16.三糖铁琼脂(TSI)
  16.1 成分
  蛋白胨                       15g
  蛋白□                  5g或蛋白胨5g
  牛肉膏                        5g
  乳糖                        10g
  蔗糖                        10g
  葡萄糖                        1g
  氯化钠                        5g
  硫酸亚铁                     0.2g
  硫代硫酸钠                    0.2g
  琼脂                     12~15g
  0.2%酚红溶液               12.5ml
  蒸馏水                    1000ml
                PH7.4
  16.2 制法 除糖、指示剂、硫酸亚铁和硫代硫酸钠外,以上各成分加入蒸馏水中,加温溶解。加入糖、硫酸亚铁及硫代硫酸钠(后二者先用少量水溶解),校正PH。加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀。分装小试管,装量宜较多。115℃灭菌30分钟。放置高层斜面,凝后置冷暗处保存备用。
  16.3 用途 供肠道菌初步鉴别用
  17.DHL 琼脂 (Deaxycholate  Hydrogen
Sulfide LactoseAgar)
  17.1 成分
  蛋白胨                       20g
  牛肉膏                        3g
  乳糖                        10g
  蔗糖                        10g
  去氧胆酸钠                      1g
  硫代硫酸钠                    2.3g
  柠檬酸钠                       1g
  柠檬酸铁铵                      1g
  中性红                     0.03g
  琼脂                     18~20g
  蒸馏水                    1000ml
            PH7.3
  17.2 制法 除中性红、琼脂外,各成分溶解于400ml蒸馏水中,校正PH,再将琼脂于600ml蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,加入0.5%中性红液6ml,待冷至50~55℃,倾注平板。
  17.3 用途 沙门氏菌分离培养用
  18.SS琼脂培养基
  18.1 成分
  蛋白胨                        5g
  牛肉膏                        5g
  琼脂                        20g
  乳糖                        10g
  胆盐                       8.5g
  柠檬酸钠(Na3C(6H5O72H2O)        8.5g
  硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O)         8.5g
  柠檬酸铁铵                      1g
  1%中性红水溶液                2.5ml
  0.1%煌绿溶液(新配)           0.33ml
  蒸馏水                    1000ml
            PH7.4
  18.2 制法 先将蛋白胨、琼脂、蒸馏水制成PH7.4的普通肉汤琼脂,121℃灭菌20分钟。趁热加入乳糖、摇匀。再依次加入其它成分,充分摇匀,使溶解,倒成平板备用。
  18.3 用途 沙门氏菌分离培养用
  注:配好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内,3天用完。
  19.尿素琼脂
  19.1 成分
  蛋白胨        1g
  氯化钠        5g
  葡萄糖        1g
  磷酸二氢钾      2g
  0.2%酚红溶液   6ml
  琼脂         20g
  蒸馏水        1000ml
  20%尿素溶液    100ml
      PH7.2±0.1
  19.2 制法 将除尿素和琼脂以外的成分配好,校正PH,加入琼脂,加热溶化并分装锥形瓶。121℃高压灭菌20分钟。冷至50~55℃,加入经过滤除菌的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%,分装于灭菌试管内,放成斜面备用。
  19.3 用途 沙门氏菌鉴别用。
  20.氰化钾培养基
  20.1 成分
  多价蛋白胨          3g
  氯化钠            5g
  磷酸二氢钾(KH2PO4)   0.225g
  磷酸氢二钠(Ka2HPO4)  5.64g
  蒸馏水            1000ml
  0.5%氰化钾溶液
           PH7.6
  20.2 制法 除氰化钾外,以上成分配好后,校正PH,121℃灭菌20分钟。冷却后,每100ml培养基加入0.5%氰化钾溶液1.5ml,分装于12×100mm灭菌试管,每管4ml,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,置4℃冰箱内,可保存两个月。同时,以不加氰化钾的培养基作对照培养基,分装试管备用。
  20.3 用途 沙门氏菌鉴别用
  注:1.氰化钾为剧毒药,操作时应特别小心。培养基用后,每管加入几粒硫酸亚铁和0.5ml 20%氢氧化钾去毒,再灭菌洗刷。
    2.封口不严。氰化钾分解逸出,致使药物浓度降低,是造成假阳性的主要原因,故应特别注意。
  21.氨基酸脱羧酶试验培养基
  21.1 成分
  蛋白胨            5g
  酵母浸膏           3g
  葡萄糖            1g
  蒸馏水            1000ml
  1.6%溴甲酚紫乙醇溶液   1ml
  L—氨基酸或DL—氨基酸   0.5或1g/100ml
          PH6.8
  21.2 制法:除氨基酸外,以上成分加热溶解后,校正PH,分装每瓶100ml。分别加入各种氨基酸:赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。L—氨基酸按0.5%加入,DL—氨基酸按1%加入。再行校正PH至6.8。同时以不加氨基酸的培养基作为对照培养基。分装于灭菌的小试管内,每管1ml,并滴加一层液体石蜡,121℃灭菌10分钟。


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